浮游菌采樣器的采樣和培養

　　微生物采樣器利用安德森采樣器，在一定的流量條件下對空氣中懸浮的微生物顆粒進行采樣，通過改變孔徑的方法將不同粒徑的顆粒物進行六級分離，達到對一定體積的氣體中所有生物活性顆粒物采集的目的。安德森原理中沒有指明每一級分別采什么菌，但卻給出了每一級所能捕獲的顆粒的粒徑范圍。一般情況下，空氣流入采樣器的橫截面積是固定的，流量與流速是成線性正比的關系。依據安德森原理，空氣中的顆粒進入采樣器，只有流速乘以顆粒的質量值足夠大，大于培養基表面氣墊阻力乘以受阻時間值時，該微生物顆粒才能吸附在培養基上，否則被風機抽走并排出采樣器。

　　所以撞擊頭的設計就成為了關鍵，這個孔開大開小，長條形還是圓形甚至五角形都是可以的，孔洞式與狹縫式除了現狀上的區別，理論上沒有其他區別，但是他們都必須要通過第三方的實驗室驗證捕獲率，通常捕獲率在90%-110%之間，都算合格的。

　　2、工作過程

　　（1）在有平臺的潔凈室內編制培養皿(XX潔凈室,XX測點),操作前應用浸濕75%乙醇的醫用脫脂棉花擦拭平臺。測試人員雙手用同樣方法嚴格消毒。在編制過程中再次仔細檢查培養基平皿的質量,有變質、破損或污染不能使用。

　　（2）用浸濕75%乙醇的醫用脫脂棉花擦拭采樣器的采樣口,采樣管、采樣器的項蓋,轉盤及罩子內外表面。

　　（3）采樣器經消毒后不放入培養皿,啟動儀器空轉運行不少于5 min,使儀器中的殘余消毒劑蒸發。

　　（4）根據被測地點的潔凈度設定采樣量，采樣器的流量(L/min)X采樣時間(min)=采樣量(L)。

　　（5）采樣操作時,培養皿應輕拿輕放,用“五指抓拿”培養皿外徑,盡量避免人為對樣本造成污染。

　　（6）根據被測地點的面積確定采樣點的布置及采樣點數量。

　　3、浮游菌采樣器的使用注意事項

　　（1）采樣器應該充分清潔滅菌。如果清潔滅菌不充分，浮游細菌采樣器上的細菌脫落飛揚，就有可能增加采到的細菌數量，測定結果可能出現巨大的誤差。

　　常用的滅菌方法有兩種，（1）使用75%乙醇對一臺采樣器每一級撞擊板的表面和背面，以及撞擊板周邊密封圈和進氣口等部位進行擦拭消毒。

　　（2）使用高壓蒸汽滅菌采樣器取下密封圈，每一級獨立包裝后使用壓

　　力蒸汽滅菌器在102.9Kpa，121℃條件下高壓滅菌30min。

　　（2）正確調節噴射距離。氣體噴射器狹縫到培養基的距離關系到細菌撞擊培養基的力度。距離較近，撞擊培養基的力度較大；距離較遠，撞擊培養基的力度較小。采樣前應將噴射距離調節到標準量值。

　　（3）將流量調節到標準量值。氣體的流量關系到氣體的噴射速度。速度過大則撞擊的力度也大，速度過小則撞擊的力度也小，所以采樣前應將流量調節到標準量值。由于采樣頭的多孔結果尺寸固定，如果采樣器流量達不到設定值，則撞擊速度將發生偏離，采集到浮游菌就有偏差。因此，采樣流量是浮游菌采樣器的重要指標。一般采用流量計對浮游菌采樣器的泵體流量進行校準測試。

　　（4）根據細菌濃度選取采樣時間。采入培養皿中的細菌數決定培養皿中細菌的密度。密度過小，統計到的細菌個數較少，統計誤差較大；密度過大，容易相互重疊，產生漏計誤差。所以培養皿中細菌的密度應適中。在氣體中細菌的濃度固定、氣體的流量固定的情況下，采樣的時間越長，培養皿中細菌的密度越大；采樣的時間越短，培養皿中細菌的密度越小。